2020年6月29日《化妆品监督管理条例》（以下简称《条例》）正式颁布，《条例》明确规定：化妆品功效宣称应当有充分的科学依据，并需公开，接受社会监督。自此，化妆品功效宣称的科学依据成为行业关注的焦点。笔者整理了国内外祛痘化妆品功效评价方法，供业内同仁借鉴参考。

　　一、体外评价方法

　　（一）抗炎功效

　　痤疮是毛囊皮脂腺单位的一种慢性炎症性皮肤病。在众多因素的影响下，痤疮丙酸杆菌等细菌利用皮脂中的甘油三酯大量繁殖，产生游离脂肪酸，而皮脂又在紫外线﹑污染物﹑金属离子等的作用下氧化分解成丙二醛﹑角鲨烯过氧化物等物质，从而刺激细胞产生炎症因子，导致炎症的发生。所以测试细胞的抗炎活性可一定程度上反映物质的抗痤疮能力。白介素（IL-1）是最早发现的与炎症相关的细胞因子之一，主要包含了IL-1α、IL-1β和IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)，IL-1α可通过调节毛囊皮脂腺漏斗部角质形成细胞的分化，引起导管的过度角化，从而引发痤疮。单核巨噬细胞THP-1是机体重要的免疫细胞，THP-1细胞在发生免疫反应时，会特异性地产生IL-1β，所以通常会将其作为炎症筛选的指标。所以，可以通过ELISA法测定细胞炎症因子IL-1α、IL-1β含量。

　　Toll样受体（Toll-likereceptors，TLRs)在生物界中广泛存在，是参与非特异性免疫的一种重要蛋白质分子，是识别病原微生物的一种跨膜受体家族。其中最主要的是TLR2和TLR4，可识别许多病原微生物如细菌、真菌及分枝杆菌的产物，促进细胞中某些促炎性因子的转录。痤疮患者的皮损处，角质形成细胞受丙酸杆菌刺激后TLR2表达升高，可激活下游的信号通路，诱导趋化因子和细胞炎症因子的生成，从而可加重痤疮的炎性反应。

　　IL-6是一种典型的具有多种生物学效应的细胞因子，是许多炎症性疾病的重要介质。痤疮丙酸杆菌和Toll受体结合，可以诱导IL-6的释放，产生一系列炎症反应，从而加重患者皮损处的损伤。所以，可通过测试IL-6的表达表征物质的抗炎活性。

　　（二）控油功效

　　痤疮患者普遍出油较多，皮脂腺分泌旺盛，人皮脂腺细胞大量分泌脂质是发生痤疮的前提条件。油红O又名苏丹红5B，为脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可特异性地使组织内甘油三酯等中性脂肪着色，用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着。利用油红O的这一特性，可对培养后的人体皮脂腺细胞进行染色观察，分析其脂质含量和形态。

　　（三）抑菌功效

　　痤疮丙酸杆菌为革兰氏染色阳性的厌氧杆菌，广泛存在于人体皮肤表面的脂质中，主要存在于正常皮肤的毛囊和汗腺中，是皮肤中的正常寄生菌群。大量研究表明痤疮丙酸杆菌与皮脂分泌、过度角化、炎症和组织损伤有着密切的关系。

　　痤疮丙酸杆菌可促进皮脂腺细胞促肾上腺皮质素释放激素（corticotropin-releasinghormone,CRH）上调，从而促进皮脂分泌。同时，痤疮丙酸杆菌可产生多种酶（蛋白酶、脂肪酶、透明质酸酶、神经酰胺糖苷内切酶等），通过损伤表皮细胞的完整性而使毛囊漏斗部过度角化，引起皮脂管的梗阻，形成痤疮。另外，痤疮丙酸杆菌可将皮脂中的甘油三酯转化为游离脂肪酸，进一步加重痤疮的进程。所以，测定受试物对痤疮丙酸杆菌的抑制效果，能反映出受试物的祛痘功效。常见的测试抑菌效果的方法为：微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度、悬液定量法测定抑菌率、抑菌环法测定抑菌效果。

　　二、人体评价方法

　　（一）皮肤油脂含量测试

　　除手掌及指腹面外，人体其余部位皮肤均有皮脂腺的存在。皮脂腺分泌和排泄的产物称为皮脂，皮脂腺将皮脂分泌至皮肤表面，并随表面汗液乳化形成皮脂膜。对于健康的皮肤来说，一定量的皮脂是必需的。但是，痤疮患者皮脂分泌明显增多，油脂过多导致毛囊堵塞，从而引发痤疮。因此，评价使用产品前后皮肤油脂含量的变化是评价治疗痤疮效果的重要方法之一。

　　测定皮肤油脂含量常用的仪器为皮肤油脂测试仪（SebumeterSM815），该仪器基于光度计原理设计，测试部位主要是一种0.1mm厚的消光胶带，该胶带吸收人体皮肤上的油脂后，会变成一种半透明的胶带，导致透光量的变化，从而间接反映皮肤油脂含量。

　　（二）经皮水分散失测试

　　皮肤是人体的第一道防线，犹如一道屏障，保护机体免受各种有害因素的损伤，保持体内水分，防止过度蒸发，从而维持机体各项功能的正常运作。皮肤的屏障有广义和狭义之分，广义的皮肤屏障是指其物理性屏障作用，狭义的皮肤屏障通常是指表皮尤其是角质层的屏障作用。研究表明，一般痤疮患者的皮肤屏障功能会受到一定损伤，痤疮患者较正常人皮肤经表皮失水率增高。皮脂分泌过多从而影响到皮肤表面的pH值。当各种因素导致皮肤组织结构和有效成分发生改变则皮肤的屏障功能也受到损害，可以不同程度地参与或者激发各种皮肤病的产生。

　　所以，采用TewameterTM300测定皮肤水分的散失TWEL，可间接反映测试物对痤疮患者皮肤的改善。

　　（三）皮肤水分含量测试

　　正常皮肤含水量为20%-35%，当皮肤含水量低于10%，一般认为皮肤屏障功能受损。痤疮患者一般皮肤屏障功能受损，影响皮肤表层的水分保持能力，从而使皮肤水分含量降低。另一方面，痤疮患者皮肤一般发生炎症反应，致使皮肤表面温度升高，加速新陈代谢，从而导致水分含量降低。因此，在进行祛痘功效评价时，水分含量的改善也是一个可观测的评价指标。

　　（四）图像分析法测试

　　卟啉（主要包含粪卟啉III、原卟啉IV）是痤疮丙酸杆菌利用油脂代谢产生的一种分泌物，常常堵塞毛孔，导致痤疮。利用VISIA或VISIA-CR拍照，在橙光条件下，卟啉可发出荧光，呈现出圆形白色的斑点。从而间接反映皮肤中痤疮丙酸杆菌的数量。荧光点计数值即卟啉值，卟啉值越高表示痤疮丙酸杆菌越多。

　　（五）受试者自我评估

　　根据样品的使用情况，通过受试者自我评估，可反映受试者自我感知的祛痘效果。同时，也可设置相应的问题，考察受试者对产品的肤感、状态等的喜爱程度。

　　以上是为大家汇总的祛痘化妆品功效评价方法。目前国内外对祛痘、改善痤疮化妆品的功效评价并没有统一的标准。对痤疮改善的体外功效评价多从抗炎、控油、抑菌三个作用途径进行评价；而人体测试方法，多采用人体试用，通过图像采集、相关指标数据采集、志愿者或专家的主观评估等方式评价产品对面部指标的改善，是评价改善痤疮功效的一种重要且有效手段。企业可以根据产品的作用途径、企业的研发实力有选择性地选取上述中的几种方法评价产品的有效性。

　　延伸阅读

　　痤疮的影响因素

　　痤疮是一种毛囊皮脂腺的慢性炎症性疾病，以粉刺、丘疹、脓包为主要临床症状，好发于青春期的面部、颈部和前胸后背等部位，所以又被称为“青春痘”“粉刺”。

　　痤疮发病的原因复杂，常与人体内分泌紊乱、皮脂分泌过多、毛囊皮脂腺导管堵塞、细菌感染和炎症反应等因素密切相关。另外，环境、遗传、免疫、精神压力、生活作息、护肤品使用不当等也提高了痤疮发生的可能性。一般认为，痤疮的发生主要与以下四方面因素有关：

　　1.皮脂过度分泌

　　皮脂由皮脂腺产生，可润滑皮肤，防止皮肤表面水分蒸发。但过多的皮脂也会导致皮脂腺功能异常。皮脂的过度分泌是导致痤疮的主要原因。痤疮患者受到内分泌中雄激素、肾上腺皮质激素释放激素等激素的影响，皮脂腺细胞和毛囊角化细胞的代谢异常，在特异性还原酶的作用下，雄激素转化为活性较强的双氢睾酮和睾酮，后者与高亲和力的雄激素受体蛋白结合，进入细胞核，调控基因表达，进而影响毛发生长和皮脂腺的增生及功能。

　　2.毛囊角化异常

　　在正常毛囊里，位于皮脂腺以及毛囊中导管管腔里的角质形成细胞脱落有序。当导管内的角质形成细胞不脱落时，它们会堵塞导管，形成痤疮。痤疮患者的角质细胞过度增生，引起皮脂腺导管上皮细胞层不断增厚、管径变小、通畅度减弱，最终导致毛囊皮脂腺导管急性闭塞，毛囊隆起而形成粉刺。

　　维生素A的缺乏、细胞因子的调节、导管内细菌、体内相关酶和激素等，对毛囊角化均有一定影响。

　　3.微生物过度繁殖

　　与痤疮相关的细菌主要包含痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、糠秕孢子菌（又称糠秕马拉色菌）、金黄色葡萄群菌，其中，以痤疮丙酸杆菌与痤疮的发生关系最大。研究表明，重度痤疮患者皮肤表面的痤疮丙酸杆菌阳性率达90.91%。痤疮丙酸杆菌可诱导和活化痤疮炎症的起始环节，并且将大量的甘油转换为脂肪酸，最终导致炎症反应。另外，痤疮丙酸杆菌还可产生蛋白酶、透明质酸酶以及趋化因子，使毛囊过度角化，最终形成粉刺。

　　4.炎症反应

　　研究表明，痤疮的各个阶段中均发现了大量的炎症介质。炎症是主要的致痤疮源。痤疮早期，病变部位首先产生促炎性因子，促使各类不同炎症细胞向病变局部聚集；后在微生物作用下产生大量炎性因子，引发一系列炎症反应。

　　除此之外，炎症的产生还可直接导致痤疮形成后的色素沉着，形成痘印。

　　根据痤疮的发病机理，痤疮可分为内源性痤疮、外源性痤疮、痤疮样发疹。其中化妆品领域关注的痤疮为内源性痤疮中的寻常性痤疮。痤疮的分级、分型，目前国内外较为广泛采用的是Pillsbury法及国际改良痤疮分级法，其分类标准见表1，分级标准见图1。

表1 痤疮分类标准

图1 痤疮分级标准图

　　以上为痤疮的致病因素及国内外较为广泛采用的分类分级标准，可为各企业了解痤疮的发生机制、从而更加科学地选择功效评价方法提供依据。

　　（作者单位：北京工商大学化妆品监管科学研究院）

(责任编辑：杨畦)